產品詳情
簡單介紹:
ATCC CCL-61(CHO-K1)
詳情介紹:
CHO-K1細胞ATCC CCL-61標準細胞株基本信息
出品公司: | ATCC |
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細胞名稱: | CHO-K1細胞, ATCC CCL-61細胞, CHOK1細胞, 倉鼠卵巢細胞 |
細胞又名: | CHO K1; CHOK1; CHO cell clone K1; GM15452 |
存儲人: | TT Puck |
種屬來源: | 中國倉鼠 |
組織來源: | 卵巢 |
疾病特征: | 正常 |
細胞形態(tài): | 上皮細胞樣 |
生長特性: | 貼壁生長 |
培養(yǎng)基: | F12K培養(yǎng)基(SIGMA,貨號N3520),90%;FBS,10%。 |
產品目錄號: | CCL-61 |
生長條件: | 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃, |
傳代方法: | 1:2至1:6,每周2次。 |
凍存條件: | 90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO,液氮儲存 |
支原體檢測: | 陰性 |
**等級: | 1 |
應用: | 該細胞可以作為轉染宿主細胞。 |
備注: |
Nucleotide (GenBank) : U06143 Cricetulus griseus ATCC CCL61 sialidase mRNA, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : U20436 Cricetulus griseus furin endoprotease (fur) mRNA, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : M87540 Cricetulus longicaudatus sodium channel alpha subunit mRNA, partial cds.
Nucleotide (GenBank) : M87541 Cricetulus longicaudatus sodium channel alpha subunit mRNA, partial cds.
Nucleotide (GenBank) : L13244 Cricetulus griseus CTP:phosphocholine cytidylyltransferase mRNA, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : L18986 Cricetulus griseus lysosomal membrane glycoprotein A (lgpA) mRNA, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : L19357 Cricetulus griseus lysosomal membrane glycoprotein B (lgpB) mRNA, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : AF043911 Cricetulus griseus telomeric repeat binding factor 1 (TRF1) mRNA, partial cds.
Nucleotide (GenBank) : U20435 Cricetulus griseus clone dsi alternatively spliced truncated furin endoprotease (fur) mRNA, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : U20434 Cricetulus griseus clone dsii alternatively spliced truncated furin endoprotease (fur) mRNA, complete cds.
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參考文獻: |
Puck TT, et al. Genetics of somatic mammalian cells III. Long-term cultivation of euploid cells from human and animal subjects. J. Exp. Med. 108: 945-956, 1958. PubMed: 13598821
Ham RG. Clonal growth of mammalian cells in a chemically defined, synthetic medium. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 53: 288-293, 1965. PubMed: 14294058
Kao FT, Puck TT. Genetics of somatic mammalian cells, VII. Induction and isolation of nutritional mutants in Chinese hamster cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 60: 1275-1281, 1968. PubMed: 5244736
Kao FT, Puck TT. Genetics of somatic mammalian cells. IV. Properties of Chinese hamster cell mutants with respect to the requirement for proline. Genetics 55: 513-524, 1967. PubMed: 6068403
Kao FT, et al. Complementation analysis on virus-fused Chinese hamster cells with nutritional markers. Science 164: 312-314, 1969. PubMed: 5813351
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細胞圖片: |
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CHO-K1細胞ATCC CCL-61倉鼠卵巢細胞特點和簡介
該細胞株是源自成年中國倉鼠卵巢深入活體組織切片的CHO細胞的亞克隆。 在本庫通過支原體檢測。CHO-K1細胞ATCC CCL-61倉鼠卵巢細胞接受后處理
1) 收到細胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得聯(lián)系。
CHO-K1細胞ATCC CCL-61倉鼠卵巢細胞培養(yǎng)操作
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。**天換液并 檢查細胞密度。2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
CHO-K1細胞ATCC CCL-61倉鼠卵巢細胞培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子 等,確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問 題,責任由客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng),待細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和 Procell 技術 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián) 系,告知細胞的具體情況,以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。